91精品在线播放-日韩欧美在线免费观看-欧美日韩一区二区在线观看-国产高清毛片-国产毛片视频-午夜资源

服務咨詢熱線:

021-66030766

TECHNICAL ARTICLES

技術文章

當前位置:首頁技術文章PCR新手指南:快速PCR技術與快速PCR儀的區別

PCR新手指南:快速PCR技術與快速PCR儀的區別

更新時間:2015-05-06點擊次數:2026

在PCR儀上完成一個PCR反應所需要的時間決定于以下幾個因素:
1、模塊升溫和降溫時間
2、模塊與PCR管內溫度平衡時間
3、延伸時間
4、循環次數
下面就以上幾點做一點分析,以便大家了解快速PCR技術與快速PCR儀的區別。

1、模塊升溫和降溫度時間
PCR儀一般會標明升溫速度和降溫速度,但標的大多是zui大變溫速度,也就是說是瞬間達到的速度。而與實驗相關的平均升降溫速度只有極少量廠家標明。以平均2度和4度(能做到平均升降溫4度的儀器極少)來計算,從95度降到55度,分別是20秒和10秒,每一個循環差20秒鐘。以一般35個循環來計算,影響實驗時間700秒,也就是不到12分鐘。實際還要考慮過沖問題,影響時間還會少些。

2、模塊與PCR管內溫度平衡時間
模塊溫度達到后,PCR管內的溫度遠沒有達到(塑料和水的導熱系數比鋁塊差300倍以上),需要時間來使二者達到平衡。一般有四種辦法來減少這一時間,一是讓模塊溫度過沖,在管內溫度快達到時降到目標溫度,但太高的過沖可能造成實際溫度過沖,影響PCR反應結果;二是減少PCR反應液的體積,但體積變小時PCR反應的可靠性會降低;三是降低PCR管的厚度,但太薄時強度不夠;四是增加PCR管與模塊貼附程度。

3、延伸時間
延伸時間與PCR產物的長度和DNA聚合酶的合成速度有關。如果PCR產物長度少于100bp時,可能考慮將延伸時間變為0(即兩步法);采用高速的DNA聚合酶也是常用的方法,但并不是所有PCR實驗都可以用高速的DNA聚合酶。

4、循環次數
循環次數與模板量及檢測要求相關。

所謂快速PCR技術是將快速PCR儀與超薄管(或特殊貼附技術)以及高速DNA聚合酶等技術整合在一起,可達到較短時間完成PCR反應。而一些廠家在向用戶推銷PCR儀時,不去說明快速PCR技術,只強調PCR儀速度快(大都用zui大升降溫速度來HuYou用戶)。好像買了快速PCR儀后,原來1個半小時的擴增時間變會縮短成半小時似的。而用戶采購了快速PCR儀后才發現并不那么回事。有不少用戶采用快速模式根本就做不出好的實驗結果。特別是進行多重PCR擴增的用戶,如*系統用于身份鑒定的試劑。

快速PCR技術與快速PCR儀是兩回事。快速PCR儀zui多只能縮短PCR反應時間10分鐘左右,要實現真正的快速PCR反應,還需要其他一些努力。大多數用戶根本就不需要快速PCR技術。

上一個:影響蠕動泵泵管性能的十個因素

返回列表

下一個:磁力攪拌器的工作原理及作用

主站蜘蛛池模板: 中文字幕国产欧美 | 久久精品国产精品亚洲毛片 | 婷婷亚洲久悠悠色在线播放 | 自拍理论片 | 成年人视频在线免费播放 | 日本男人的天堂 | 综合网站 | 九九干 | 她也啪97在线视频 | 日本久久综合网 | 日本国产欧美 | 国产日韩一区二区三区在线观看 | 亚洲第一大网站 | 亚洲在线视频免费 | hd欧美xxx欧美极品hd | 国产盗摄精品一区二区三区 | 夜色sese| 日韩男人的天堂 | 国产三级视频在线播放 | 国产在线视频欧美亚综合 | 一级毛片q片 | 日韩一区二区精品久久高清 | 99免费在线播放99久久免费 | 国产在线播放一区 | 欧美一级毛片高清毛片 | a毛片视频 | 一级在线观看视频 | 91香蕉国产线观看免 | 欧美白人最猛性xxxxx | 成人免费视频一区 | 碰碰碰精品视频在线观看 | 成 人 免费 网站 | 亚洲性色视频 | 亚洲加勒比久久88色综合1 | 亚洲国产一区在线二区三区 | 免费视频久久 | 亚洲日本欧美产综合在线 | 亚洲成人午夜影院 | 亚洲欧美另类在线视频 | 一级毛片真人不卡免费播 | 九九亚洲 |